Critérios que a Vet Molecular aplica no recebimento de amostras para exames de biologia molecular. Publicamos esta lista porque a maior parte das amostras inviabilizadas o é por motivos evitáveis na origem — e uma amostra rejeitada custa ao veterinário uma nova coleta e ao paciente um atraso no diagnóstico.
Critérios de aceitação
- Identificação legível e consistente com a documentação enviada.
- Volume ou quantidade compatível com o mínimo exigido pela metodologia.
- Integridade do recipiente primário: sem vazamento, rompimento ou contaminação externa.
- Temperatura compatível com a cadeia de frio especificada, verificada e registrada no recebimento.
- Tempo entre coleta e recebimento dentro do prazo estabelecido para a matriz.
Motivos de rejeição
Identificação e documentação
- Ausência ou inconsistência de identificação entre o recipiente e a requisição.
Integridade da amostra
- Vazamento, rompimento do recipiente ou contaminação grosseira externa.
- Volume insuficiente para a metodologia solicitada.
- Recebimento fora da temperatura ou do prazo especificados, quando isso comprometa previsivelmente a integridade do ácido nucleico — autólise tecidual evidente ou swab ressecado, por exemplo.
Fixação e anticoagulante incorretos
- Amostra fixada em formalina ou formol. A fixação formólica degrada e faz reticulação dos ácidos nucleicos, inviabilizando a maioria das PCRs de rotina. Reserve fragmento pareado em formalina apenas para histopatologia, em frasco separado e claramente identificado.
- Heparina como anticoagulante em sangue destinado a PCR de rotina — inibe a polimerase. Use EDTA (tampa lilás).
Interferentes que inibem a reação
- Hemólise acentuada. A liberação de hemoglobina e do grupo heme inibe fortemente a reação em cadeia da polimerase.
- Lipemia acentuada e icterícia ou bilirrubina em quantidade elevada.
- Excesso de pigmentos biliares ou sais nas fezes, e amostras fecais ressecadas.
- Swabs com haste de madeira ou ponta de algodão, e meios de transporte com carvão ativado. Use haste de plástico ou alumínio, com ponta de poliéster, rayon ou dacron.
- Contaminação com terra em fezes ou tecidos, que favorece inibidores de PCR.
O que acontece quando uma amostra é rejeitada
Toda rejeição é registrada, comunicada formalmente ao solicitante e, sempre que possível, seguida da solicitação de nova coleta. Quando a não conformidade não compromete de forma previsível o resultado, a amostra pode ser processada sob ressalva documentada, e a ressalva consta do laudo.
Como evitar
Consulte as orientações de coleta e envio antes da coleta. Em caso de dúvida sobre a melhor amostra para a suspeita clínica, fale com a equipe técnica — é mais rápido que repetir a coleta.